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在病原体感染过程中,通过检测患者急性期血清中某病原体特异性IgM抗体分子,从而起到早期诊断之目的。通常有两种ELISA设计方式用于检测人IgM抗体,一种是人IgM间接ELISA(Fig.1),另外一种是人IgM捕获ELISA(Fig.2)。本项目组可提供小鼠抗人IgM单克隆抗体,分别用于人IgM间接ELISA(命名为MAb0040、HRP0040)和人IgM捕获ELISA(命名为MAb0035、MAb0038)。
Fig.1 人IgM间接ELISA模式图.
Fig.2 人IgM捕获ELISA模式图.
该批单抗是用纯化的人IgM抗体蛋白免疫小鼠制备的杂交瘤抗体。MAb0040重轻链同种型为γ2a/κ,MAb0035、MAb0038重轻链同种型分别为γ2b/κ和γ1/κ。该批单抗只与人IgM抗体重链μ结合,与人IgG、IgA、IgE无交叉,与人抗体轻链(κ、λ)无交叉(Fig.3)。
Fig.3 MAb0040、0038、0035与人IgG、IgA、IgE的交叉反应性.
MAb0040在人IgM间接ELISA体系中作为酶标二抗(Fig.1),该单抗显示出背景低、信噪比高的优势(Tab.1),适合急性期传染病患者的早期诊断。
Tab.1 人阴性血清在MAb0040介导的人IgM间接ELISA上的OD450nm读值(以COVID-19为例),所有人血清1:100稀释. PC:阳参;Blk:空白对照. Cutoff=0.258
MAb0035和MAb0038在人IgM捕获ELISA体系中联合使用作为捕获抗体,能有效捕获血清中IgM抗体分子,引起IgM抗体构象改变,便于与抗原表位的结合(Tab.2)。
Tab.2 MAb0035、MAb0038单抗在人IgM捕获ELISA体系中作为捕获抗体的能力比较(以SFTSV为例).
小鼠抗人μ重链单克隆抗体(MAb0040、HRP0040、MAb0035、MAb0038)